sábado, 6 de diciembre de 2014

Citrato de Simmons 17 de Octubre del 2014

El CITRATO DE SIMMONS es un medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como única fuente de carbono y energía.
Fundamento:  En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimático. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, y el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color azul en medio alcalino. El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono, usan sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consiguiente producción de alcalinidad.
  Este se inocula por el método de siembra que es por agotamiento en la superficie del agar inclinado y este pasa a incubarse a 37°C durante 24 horas.
                                    
Medio recién inoculado
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico. El desdoblamiento del citrato da progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen a ácidos orgánicos que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasaTras el periodo de incubación se procede a la lectura de los resultados, si el medio vira a color azul será citrato positivo, de lo contrario será citrato negativo. 

Citrato (+)  Citrato (-)

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